??近日,，我室王建華研究組在國(guó)際學(xué)術(shù)期刊Journal of Virology在線發(fā)表了題為HIV-1 Nef activates proviral DNA transcription via recruiting Src kinase to phosphorylate host protein Nef-associated factor 1 to compromise its viral restrictive function的研究論文,。該研究揭示Nef蛋白激活潛伏HIV的新功能。機(jī)制上,，HIV Nef蛋白通過(guò)招募Src酪氨酸激酶磷酸化宿主蛋白Naf1,逆轉(zhuǎn)Naf1對(duì)HIV的抑制作用，通過(guò)激活PI3K/AKT/mTORC1細(xì)胞信號(hào)通路,，進(jìn)而激活HIV前病毒DNA的轉(zhuǎn)錄和激活潛伏的HIV,。
HIV編碼的Nef蛋白（Negative Factor，負(fù)調(diào)控因子）可下調(diào)免疫細(xì)胞CD4和MHC等分子抑制機(jī)體免疫,，并可增強(qiáng)病毒復(fù)制和傳播等,，是一個(gè)重要的病毒致病因子。但Nef蛋白是否可調(diào)控潛伏HIV再激活未見(jiàn)過(guò)多報(bào)道,。Naf1(Nef-associated factor 1) 是可與HIV Nef相互作用的宿主蛋白,，可被包入到HIV病毒粒子中。 Naf1可調(diào)控多種細(xì)胞信號(hào)通路包括可抑制NF-κB 細(xì)胞信號(hào),。Naf1對(duì)HIV感染顯示了多重調(diào)控作用,。王建華研究組前期發(fā)現(xiàn)Naf1是可在細(xì)胞核/質(zhì)間穿梭的宿主因子（2016, J. Bio. Chem）。細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中定位的Naf1在調(diào)控HIV復(fù)制方面具有截然不同的功能,。細(xì)胞核內(nèi)定位的Naf1與另外一個(gè)宿主因子CRM1（Chromosome region maintenance 1）協(xié)作,，促進(jìn)HIV未剪切gag mRNA的出核,，促進(jìn)HIV Gag蛋白的產(chǎn)生（2016, J. Bio. Chem）；而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)定位的Naf1通過(guò)抑制NF-κB 信號(hào)通路的激活,，阻斷HIV-LTR（Long terminal repeat）啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的病毒轉(zhuǎn)錄,，維持病毒的潛伏（2017，J. Virol.）,。最近,，王建華研究組發(fā)現(xiàn)HIV Gp120蛋白刺激可誘導(dǎo)Naf1在髓系細(xì)胞（樹突狀細(xì)胞和CD14+單核細(xì)胞）中的表達(dá)，抑制HIV復(fù)制,，特別是可消弱樹突狀細(xì)胞免疫刺激能力從而利于逃避免疫（2025,，Virol Sin）。
Naf1作為HIV Nef相互作用蛋白,，其與Nef相互作用如何調(diào)控HIV復(fù)制尚不清楚,。本論文發(fā)現(xiàn)，Nef蛋白可激活潛伏HIV,，揭示了Nef調(diào)控HIV復(fù)制的新功能,。特別發(fā)現(xiàn)，Nef激活潛伏HIV的功能需要Naf1這一HIV抑制因子的存在,。通過(guò)深入分析這一看似“矛盾”的因素,，發(fā)現(xiàn)Nef可通過(guò)招募Src酪氨酸激酶導(dǎo)致Naf1 552位點(diǎn)酪氨酸的磷酸化；而Naf1-Y552位點(diǎn)的磷酸化則可使Naf1的“抑制”作用轉(zhuǎn)換為“激活”功能,。機(jī)制上,，磷酸化的Naf1通過(guò)激活PI3K/AKT/mTORC1細(xì)胞信號(hào)通路，進(jìn)而激活HIV前病毒DNA的轉(zhuǎn)錄和激活潛伏的HIV,。該研究揭示了病毒蛋白與宿主蛋白相互作用調(diào)控HIV復(fù)制的新模式,，并為抗病毒治療提供潛在的治療靶點(diǎn)。
本文第一作者是樊天嬌博士（國(guó)家傳染病醫(yī)學(xué)中心,，上海感染與免疫科技創(chuàng)新中心）和謝承作博士研究生（廣州國(guó)家實(shí)驗(yàn)室,，廣州醫(yī)科大學(xué)）。通訊作者是王建華教授（河南師范大學(xué)抗病毒性傳染病創(chuàng)新藥物全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,；中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院）,。該研究得到來(lái)自國(guó)家基金委、廣東自然科學(xué)基金和呼吸疾病全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等項(xiàng)目的資助,。
模式圖： Nef通過(guò)招募Src激酶磷酸化Naf1促進(jìn)HIV前病毒DNA轉(zhuǎn)錄,。細(xì)胞內(nèi)和病毒粒子釋放的Naf1抑制PI3K/AKT/mTORC1通路。然而,，HIV Nef招募Src激酶導(dǎo)致Naf1 552位點(diǎn)酪氨酸的磷酸化,，使Naf1的“抑制”作用轉(zhuǎn)換為“激活”功能。磷酸化的Naf1通過(guò)激活PI3K/AKT/mTORC1細(xì)胞信號(hào)通路,，將轉(zhuǎn)錄因子P-TEFb（CDK9和Cyclin T1的復(fù)合物）募集到LTR區(qū)域以驅(qū)動(dòng)前病毒DNA轉(zhuǎn)錄,。