2022年2月22日,,我校生命科學(xué)學(xué)院余國(guó)營(yíng)教授與復(fù)旦大學(xué)附屬上海市公共衛(wèi)生臨床中心張馳宇研究員合作的研究論文《Multiplex, Real-Time,Point-of-care RT-LAMP for SARS-CoV-2 Detection Using the HFman Probe》,在線發(fā)表在美國(guó)化學(xué)會(huì)重要學(xué)術(shù)期刊《ACS SENSORS》(中科院分區(qū)一區(qū)TOP),。
核酸檢測(cè)是目前世界上檢測(cè)新冠病毒的標(biāo)準(zhǔn)方法,,其中,基于RT-qPCR的核酸檢測(cè)技術(shù)被公認(rèn)為SARS-CoV-2確診的金標(biāo)準(zhǔn),,但受限于其較長(zhǎng)的檢測(cè)時(shí)長(zhǎng),、以及對(duì)昂貴儀器和專(zhuān)業(yè)人員的高度依賴性。因此,,對(duì)簡(jiǎn)便,、快速、特異,、靈敏的核酸床邊診斷(POCT)技術(shù)提出了緊迫的需求,。環(huán)介導(dǎo)的恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)是目前最受關(guān)注的核酸POCT診斷技術(shù),然而存在非特異性擴(kuò)增,、無(wú)法單管多重檢測(cè),、容易漏檢等問(wèn)題。
本研究針對(duì)以上問(wèn)題,,團(tuán)隊(duì)建立了一種耐突變,、多重?zé)晒釸T-LAMP檢測(cè)技術(shù)。利用該技術(shù),,團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了針對(duì)新冠病毒ORF和E基因以及人類(lèi)管家基因β-actin的單管三重LAMP檢測(cè)體系,,實(shí)現(xiàn)高特異性和高靈敏度(3-30拷貝每反應(yīng))檢測(cè)。臨床樣品評(píng)估顯示,其檢測(cè)靈敏度為94.5%,,特異性為100%,,與商業(yè)RT-qPCR試劑盒相比檢測(cè)一致率為96.8%。采用樣本核酸免提取方案,,該方法僅需要一個(gè)可以恒溫加熱的設(shè)備,,結(jié)合一個(gè)465nm的LED藍(lán)光燈,即可實(shí)現(xiàn)45min內(nèi)從采樣到可視化結(jié)果讀取,,可應(yīng)用于社區(qū)或野外快速即時(shí)(POCT)檢測(cè),。
該研究由河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院與上海市公共衛(wèi)生臨床中心、英國(guó)Glasgow大學(xué),,上海市國(guó)際旅游健康中心合作完成,,我校碩士生東亞娟為第一作者,生命科學(xué)學(xué)院為第一作者單位,,上海市公共衛(wèi)生臨床中心趙勇娟為共同第一作者,,張馳宇研究員,Jonathan M. Cooper,,田楨干主任為共同通訊作者,。此外,研究團(tuán)隊(duì)前期為了篩選更高效的LAMP引物用于SARS-CoV-2的POCT檢測(cè),,我們比較評(píng)估了19套已經(jīng)發(fā)表的SARS-CoV-2的LAMP引物,,并從中篩選出5套擴(kuò)增效率高,特異性好的LAMP引物,,推薦用于SARS-CoV-2的高靈敏POCT檢測(cè)和篩查,。文章以東亞娟為第一作者發(fā)表在Sci Report 2021, Feb3;11(1):2936.
文章鏈接:https://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/acssensors.1c02079
(生命科學(xué)學(xué)院 張江利)