2022年2月22日,,我校生命科學學院余國營教授與復(fù)旦大學附屬上海市公共衛(wèi)生臨床中心張馳宇研究員合作的研究論文《Multiplex, Real-Time,Point-of-care RT-LAMP for SARS-CoV-2 Detection Using the HFman Probe》,,在線發(fā)表在美國化學會重要學術(shù)期刊《ACS SENSORS》(中科院分區(qū)一區(qū)TOP)。
核酸檢測是目前世界上檢測新冠病毒的標準方法,,其中,,基于RT-qPCR的核酸檢測技術(shù)被公認為SARS-CoV-2確診的金標準,但受限于其較長的檢測時長,、以及對昂貴儀器和專業(yè)人員的高度依賴性,。因此,對簡便,、快速,、特異、靈敏的核酸床邊診斷(POCT)技術(shù)提出了緊迫的需求,。環(huán)介導的恒溫擴增技術(shù)(LAMP)是目前最受關(guān)注的核酸POCT診斷技術(shù),,然而存在非特異性擴增、無法單管多重檢測,、容易漏檢等問題,。
本研究針對以上問題,團隊建立了一種耐突變,、多重熒光RT-LAMP檢測技術(shù),。利用該技術(shù),團隊開發(fā)了針對新冠病毒ORF和E基因以及人類管家基因β-actin的單管三重LAMP檢測體系,,實現(xiàn)高特異性和高靈敏度(3-30拷貝每反應(yīng))檢測,。臨床樣品評估顯示,其檢測靈敏度為94.5%,,特異性為100%,,與商業(yè)RT-qPCR試劑盒相比檢測一致率為96.8%。采用樣本核酸免提取方案,,該方法僅需要一個可以恒溫加熱的設(shè)備,,結(jié)合一個465nm的LED藍光燈,即可實現(xiàn)45min內(nèi)從采樣到可視化結(jié)果讀取,,可應(yīng)用于社區(qū)或野外快速即時(POCT)檢測,。
該研究由河南師范大學生命科學學院與上海市公共衛(wèi)生臨床中心,、英國Glasgow大學,上海市國際旅游健康中心合作完成,,我校碩士生東亞娟為第一作者,,生命科學學院為第一作者單位,上海市公共衛(wèi)生臨床中心趙勇娟為共同第一作者,,張馳宇研究員,,Jonathan M. Cooper,,田楨干主任為共同通訊作者,。此外,研究團隊前期為了篩選更高效的LAMP引物用于SARS-CoV-2的POCT檢測,,我們比較評估了19套已經(jīng)發(fā)表的SARS-CoV-2的LAMP引物,,并從中篩選出5套擴增效率高,特異性好的LAMP引物,,推薦用于SARS-CoV-2的高靈敏POCT檢測和篩查,。文章以東亞娟為第一作者發(fā)表在Sci Report 2021, Feb3;11(1):2936.
文章鏈接:https://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/acssensors.1c02079
(生命科學學院 張江利)